Niniejsze badanie wykazało, że grzyb korzeniowy Kosakonia oryziphila NP19, wyizolowany z korzeni ryżu, jest obiecującym biopestycydem wspomagającym wzrost roślin i środkiem biochemicznym do zwalczania zarazy ryżu. Eksperymenty in vitro przeprowadzono na świeżych liściach aromatycznych sadzonek ryżu Khao Dawk Mali 105 (KDML105). Wyniki wykazały, że NP19 skutecznie hamował kiełkowanie zarodników grzyba wywołującego zarazę ryżu. Zakażenie grzybicze zostało zahamowane w trzech różnych warunkach: inokulacja ryżu za pomocą NP19 i zarodników grzyba; jednoczesna inokulacja liści za pomocą NP19 i zarodników grzyba; oraz inokulacja liści zarodnikami grzyba, a następnie inokulacja liści zarodnikami grzyba NP19 30 godzin później. Ponadto, NP19 zmniejszył wzrost strzępek grzyba o 9,9–53,4%. W eksperymentach w doniczkach NP19 zwiększył aktywność peroksydazy (POD) i dysmutazy ponadtlenkowej (SOD) odpowiednio o 6,1% do 63,0% i 3,0% do 67,7%, co wskazuje na wzmocnione mechanizmy obronne roślin. W porównaniu z niezainfekowanymi kontrolami NP19, rośliny ryżu zakażone NP19 wykazały wzrost zawartości pigmentu o 0,3%–24,7%, liczby pełnych ziaren w wiechach o 4,1%, plonu pełnych ziaren o 26,3%, wskaźnika masy plonu o 34,4% i zawartości związku aromatycznego 2-acetylo-1-piroliny (2AP) o 10,1%. W roślinach ryżu zakażonych zarówno NP19, jak i zarazą, wzrosty wyniosły odpowiednio 0,2%–49,2%, 4,6%, 9,1%, 54,4% i 7,5%. Doświadczenia polowe wykazały, że rośliny ryżu skolonizowane i/lub zaszczepione preparatem NP19 wykazywały wzrost liczby pełnych ziaren w wiechach o 15,1–27,2%, plonu pełnego ziarna o 103,6–119,8% oraz zawartości 2AP o 18,0–35,8%. Te rośliny ryżu wykazywały również wyższą aktywność SOD (6,9–29,5%) w porównaniu z roślinami ryżu zakażonymi zarazą, nieszczepionymi preparatem NP19. Dolistne zastosowanie preparatu NP19 po zakażeniu spowolniło rozwój zmian chorobowych. Wykazano zatem, że K. oryziphila NP19 jest potencjalnym bioagentem stymulującym wzrost roślin i biopestycydem w zwalczaniu zarazy ryżu.
Skuteczność fungicydów zależy jednak od wielu czynników, takich jak skład, czas i sposób aplikacji, nasilenie choroby, skuteczność systemów prognozowania chorób oraz pojawienie się szczepów odpornych na fungicydy. Ponadto stosowanie fungicydów chemicznych może powodować toksyczność resztkową w środowisku i stanowić zagrożenie dla zdrowia użytkowników.
W eksperymencie w doniczkach nasiona ryżu poddano sterylizacji powierzchniowej i wykiełkowano zgodnie z powyższym opisem. Następnie zasiano je szczepem K. oryziphila NP19 i przesadzono do tacek. Siewki inkubowano przez 30 dni, aby umożliwić kiełkowanie sadzonek ryżu. Następnie przesadzono je do doniczek. Podczas przesadzania rośliny ryżu nawożono, aby przygotować je do zakażenia grzybem wywołującym zarazę ryżu i sprawdzić ich odporność.
W eksperymencie polowym kiełkujące nasiona zakażone grzybem Aspergillus oryzae NP19 poddano działaniu opisanej powyżej metody i podzielono na dwie grupy: nasiona zakażone grzybem Aspergillus oryzae NP19 (RS) i nasiona niezainfekowane (US). Kiełkujące nasiona wysiano w tackach z wysterylizowaną glebą (mieszanką gleby, palonych łusek ryżowych i obornika w stosunku wagowym 7:2:1) i inkubowano przez 30 dni.
Zawiesinę zarodników K. oryziphila dodano do ryżu R i po 30 godzinach inkubacji dodano 2 μl K. oryziphila NP19 w tym samym miejscu. Wszystkie płytki Petriego inkubowano w temperaturze 25°C w ciemności przez 30 godzin, a następnie inkubowano pod ciągłym oświetleniem. Każdą grupę powtórzono trzykrotnie. Po 72 godzinach inkubacji skrawki roślin zbadano i poddano mikroskopii skaningowej. W skrócie, skrawki roślin utrwalono w buforowanym roztworze soli fizjologicznej zawierającym 2,5% (v/v) glutaraldehydu i odwodniono w serii roztworów etanolu. Próbki wysuszono w punkcie krytycznym dwutlenkiem węgla, a następnie pokryto warstwą złota i obserwowano pod mikroskopem skaningowym przez 15 minut.
Czas publikacji: 13-10-2025